产品货号:
GL0903
中文名称:
福尔根DNA染色液
英文名称:
Feulgen DNA Stain
产品规格:
3×50mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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福尔根DNA染色液原理在于DNA经温和的弱酸(例如盐酸)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色,紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团,所以凡含有DNA的部位就呈紫红色,该水解作用不影响核糖-嘌呤结合键,因此RNA用此法处理后则分解,所以该法不适用于证明RNA。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等,其中最经典的是Feulgen法,该法是一种经典的酶组织化学法。
组分 | 规格 | 保存 |
Schiff Reagent | 50mL | 4℃避光 |
弱酸溶液 | 50mL | RT |
亚硫酸盐溶液 | 50mL |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
- 蒸馏水、系列乙醇、Carnoy固定液或10%福尔马林固定液
- 二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液、亮绿或苯胺蓝染色液
- 恒温箱
- 水解时间很重要,并且应使用恰当的固定时间。不同的固定液水解时间不一样。
固定液 水解时间(min) Carnoy固定液 8min Helly固定液 8min Susa固定液 18min 福尔马林 8min Zenker液 5min - 注意Schiff Reagent的纯净程度,若变浅粉红亦可考虑使用,颜色变红则弃用。
- 去除切片上多余Schiff Reagent的方法以SO2水洗为好。
- 应做阴性对照试验。
- 上述试剂均对人体有刺激性,请注意适当防护。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 石蜡切片染色
- 组织固定:Carnoy固定较好,10%福尔马林亦可,不宜采用Bouin固定液。
- 石蜡切片经二甲苯或bjbalb脱蜡透明液脱蜡至蒸馏水。
- 配制弱酸工作液:按弱酸溶液∶蒸馏水=1∶4配制,即取1份弱酸溶液、4份蒸馏水,充分混合,即获得弱酸工作液。
- 配制SO2水工作液:按弱酸溶液∶亚硫酸盐溶液∶蒸馏水=1∶5∶94配制,即取弱酸溶液1份、亚硫酸盐溶液5份、蒸馏水94份,充分混合,即配即用。
- 切片入弱酸工作液,室温浸洗10~20s。
- 切片入预热至60℃的弱酸工作液,孵育8min。
- 切片入弱酸工作液中,室温浸洗10~20s,蒸馏水冲洗。
- 切片入Schiff Reagent,室温避光染色45~90min。
- 用新鲜配制的SO2水工作液洗切片3次,每次90s。
- 蒸馏水中洗净,经系列乙醇脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明并封片。
- 组织固定:Carnoy固定较好,10%福尔马林亦可,不宜采用Bouin固定液。
- 冰冻切片染色
- 冰冻切片预处理:用乙酸∶无水乙醇(1∶3)混合固定10min。
- 由无水乙醇脱水至蒸馏水。
- 余下步骤同上述石蜡切片染色。
- 冰冻切片预处理:用乙酸∶无水乙醇(1∶3)混合固定10min。
细胞核内DNA:红紫色
将同样切片经上述步骤处理,只有步骤6改为“切片入蒸馏水室温孵育8min。”结果为细胞核DNA阴性。
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